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泥土高速冷冻离心理在泥土DNA提取中的利用

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更新功夫:2022-11-08 点击量:2229
  使用泥土高速冷冻离心理的所有回头都拥有回头自锁职能,可能轻松装卸,同时所有回头都可能高温高压灭菌,保险了使用者的安全性。
  
  泥土高速冷冻离心理具体提取泥土DNA的步骤:
  
  一、泥土样本预处置:
  
  1、取500mg泥土样本至研磨管中。
  
  2、参与980µL缓冲液,柔和涡旋混匀。
  
  3、参与120μL裂解液。
  
  4、将研磨管置于研磨仪中,40Hz处置40sec。
  
  5、12000rpm离心5min,沉淀碎片颗粒。
  
  6、转移上清液至2mL离心管中。参与250μL去蛋白液,手颠簸晃混匀。4℃搁置5min。
  
  7、12000rpm离心3min,之后取不多于900μL上清液,转移至2mL离心管中。
  
  8、参与1/3体积的结合液,柔和涡旋混匀。4℃搁置5min。
  
  9、12000rpm室温离心1min。转移上清液至5mL离心管中。
  
  10、参与1.5倍体积的缓冲液,立即奏乐混匀。
  
  二、DNA提。
  
  1、将DNA吸附柱套入2mL网络管中,备用。
  
  2、将预处置混合液参与到DNA吸附柱中,12,000rpm室温离心1min,弃掉废液。
  
  3、将DNA吸附柱放回网络管,参与600µL漂洗液,12,000rpm室温离心30sec,弃废液。
  
  4、沉复一遍步骤3。
  
  5、将DNA吸附柱放回网络管,空柱12,000rpm离心2min,以除去残留的漂洗液。
  
  6、将DNA吸附柱放入新的干净1.5mL离心管中,在滤膜中央参与30-100µL洗脱液,室温搁置3min。而后12,000rpm离心1min,网络滤液即为样本DNA。
  
  7、DNA样品可置于-20℃短期保留,-80℃持久保留。

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